Fenilgalaktozid CAS: 2818-58-8

Efekti në aktivitetin enzimatik: Fenilgalaktozidi përdoret zakonisht për të matur aktivitetin e enzimës β-galaktozidazë. Kur fenilgalaktozidi hidrolizohet nga β-galaktozidaza, ai çliron p-nitrofenol. Akumulimi i p-nitrofenolit mund të matet në mënyrë sasiore, duke ofruar njohuri mbi aktivitetin e β-galaktozidazës. Ky efekt shfrytëzohet në aplikime të tilla si analizat enzimatike dhe sistemet e shqyrtimit.

Analiza e shprehjes së gjenit: Fenilgalaktozidi përdoret shpesh si substrat në eksperimentet e biologjisë molekulare për të studiuar shprehjen e gjenit. Gjeni lacZ, i cili kodon β-galaktozidazën, zakonisht bashkohet me sekuenca rregullatore të gjeneve të tjera me interes. Shprehja e gjenit lacZ dhe hidroliza e fenilgalaktozidit nga β-galaktozidaza mund të tregojë modelin e shprehjes dhe nivelin e gjenit të synuar që po studiohet.

Sistemet e shqyrtimit: Fenilgalaktozidi është një komponent i rëndësishëm i sistemeve të shqyrtimit që përdorin aktivitetin e β-galaktozidazës. Një shembull i njohur gjerësisht është metoda e shqyrtimit blu-bardhë, e cila përdoret për të identifikuar qelizat rekombinante ose të transformuara në eksperimentet e biologjisë molekulare. Kolonitë që kanë marrë me sukses ADN-në rekombinante ose i janë nënshtruar rekombinimit gjenetik do të shprehin β-galaktozidazën, duke çuar në hidrolizën e fenilgalaktozidës dhe formimin e një ngjyre blu.

Pastrimi i proteinave: Në disa raste, fenilgalaktozidi mund të përdoret si ligand për kromatografinë e afinitetit për të pastruar proteinat që lidhen posaçërisht me ose aktivizohen nga β-galaktozidaza. Proteina me interes mund të ketë një etiketë afiniteti ose një etiketë bashkimi që përmban një domen që lidhet me β-galaktozidazën. Duke kaluar përzierjen e proteinave përmes një kolone me fenilgalaktozid të imobilizuar, proteina e dëshiruar mund të mbahet në mënyrë selektive dhe më pas të eluohet.