IPTG CAS:367-93-1 Çmimi i prodhuesit
Izopropil β-D-1-tiogalaktopiranozidi (IPTG) është një analog sintetik i laktozës që përdoret zakonisht në kërkimin e biologjisë molekulare dhe aplikimet bioteknologjike.IPTG përdoret kryesisht për të nxitur shprehjen e gjeneve në sistemet bakteriale, ku shërben si një nxitës molekular për të nisur transkriptimin e gjeneve të synuara.
Kur shtohet në mjedisin e rritjes, IPTG merret nga bakteret dhe mund të lidhet me proteinën represore lac, duke e penguar atë të bllokojë aktivitetin e operonit lac.Operoni lac është një grup gjenesh të përfshirë në metabolizmin e laktozës dhe kur hiqet proteina represore, gjenet shprehen.
IPTG përdoret shpesh në lidhje me promotorin mutant lacUV5, i cili është një version konstituivisht aktiv i promotorit lac.Duke kombinuar induksionin IPTG me këtë promotor mutant, studiuesit mund të arrijnë nivele të larta të shprehjes së gjeneve.Kjo lejon prodhimin e sasive të mëdha të proteinave për pastrim ose aplikime të tjera në rrjedhën e poshtme.
Përveç shprehjes së gjeneve, IPTG përdoret gjithashtu shpesh në analizat e shqyrtimit blu/bardhë.Në këtë teknikë, gjeni lacZ zakonisht shkrihet me një gjen me interes dhe bakteret që shprehin me sukses këtë gjen të shkrirjes do të prodhojnë një enzimë aktive β-galaktozidazë.Kur shtohet IPTG së bashku me një substrat kromogjen si X-gal, bakteret që shprehin gjenin e shkrirjes bëhen blu për shkak të aktivitetit të β-galaktozidazës.Kjo lejon identifikimin dhe përzgjedhjen e shtameve rekombinante që kanë integruar me sukses gjenin e interesit.
Induksioni i shprehjes së gjeneve: IPTG përdoret zakonisht për të nxitur shprehjen e gjeneve të synuara në sistemet bakteriale.Ai imiton laktozën induktore natyrale dhe lidhet me proteinën represore lac, duke e penguar atë të bllokojë operonin lac.Kjo lejon transkriptimin dhe shprehjen e gjeneve të dëshiruara.
Shprehja dhe pastrimi i proteinave: Induksioni IPTG përdoret shpesh për të prodhuar sasi të mëdha të proteinave rekombinante për qëllime të ndryshme, të tilla si studime biokimike, prodhimi terapeutik ose analiza strukturore.Duke përdorur vektorët e duhur të shprehjes dhe induksionin IPTG, studiuesit mund të arrijnë nivele të larta të prodhimit të proteinave të synuara në bujtësit bakterialë.
Ekzaminimi blu/bardhë: IPTG përdoret shpesh në kombinim me gjenin lacZ dhe një substrat kromogjen, si X-gal, për analizat e shqyrtimit blu/bardhë.Gjeni lacZ zakonisht shkrihet me gjenin e interesit dhe bakteret që shprehin me sukses këtë gjen të shkrirjes do të prodhojnë një enzimë aktive β-galaktozidazë.Kur shtohet IPTG dhe substrati kromogjen, shtamet rekombinante që shprehin gjenin e shkrirjes bëhen blu, duke lejuar identifikimin dhe përzgjedhjen e lehtë.
Studimi i rregullimit të gjeneve: Induksioni IPTG përdoret zakonisht në kërkime për të studiuar rregullimin e gjeneve dhe operoneve, veçanërisht të operonit lac.Duke manipuluar përqendrimet e IPTG dhe duke monitoruar shprehjen e përbërësve të operonit lac, studiuesit mund të hetojnë mekanizmat e rregullimit të gjeneve dhe rolin e faktorëve ose mutacioneve të ndryshme.
Sistemet e shprehjes së gjeneve: IPTG është një komponent thelbësor në disa sisteme të shprehjes së gjeneve, siç janë sistemet e bazuara në promotor T7.Në këto sisteme, promotori lac përdoret shpesh për të nxitur shprehjen e polimerazës T7 ARN, e cila, nga ana tjetër, transkripton gjenet e synuara nën kontrollin e sekuencave të promotorit T7.IPTG përdoret për të nxitur shprehjen e T7 ARN polimerazës, duke çuar në aktivizimin e shprehjes së gjenit të synuar.
Përbërja | C9H18O5S |
Analiza | 99% |
Pamja e jashtme | Pluhur i bardhë |
CAS Nr. | 367-93-1 |
Paketimi | Të vogla dhe me shumicë |
Jetëgjatësia | 2 vjet |
Magazinimi | Ruani në zonë të ftohtë dhe të thatë |
Certifikimi | ISO. |